1. Onlayn filtrlardan foydalaning
In-line filtri avtonamuna oluvchi va xromatografik ustun (yoki himoya ustuni) orasiga joylashtiriladi. Umumiy in-line filtrlari almashtiriladigan frit (0,5 mkm yoki 0,2 mkm) va bir martalik PEEK bilan zanglamaydigan po'latdan yasalgan ichki filtrlarga bo'linadi. Turli materiallardan tayyorlangan onlayn filtrlar uchun, odatda, xromatografik kolonka plitasini to'sib qo'yishi mumkin bo'lgan zarrachalarni samarali ushlab turish uchun ustunli to'qimalar plastinkasidan kichikroq teshikka ega bo'lgan elak plitasi tanlanishi kerak. Asbobning bosimi ko'tarila boshlaganligi aniqlangandan so'ng, in-line filtri frit tiqilib qola boshlagan bo'lishi mumkin va biz uni to'liq tiqilib qolmasdan oldin yangilashimiz kerak.
In-line filtrlari xuddi membranalar kabi ishlaydi, lekin hech qanday qo'shimcha ishni talab qilmaydi. Namuna santrifüj qilingandan so'ng, hali ham oz miqdordagi zarrachalar asbobga kirishi mumkin va qoldiq zarrachalar xromatografik ustun oldida joylashgan in-line filtri tomonidan ushlab turilishi mumkin. Bundan tashqari, onlayn filtrning afzalligi shundaki, u oddiy va oson almashtiriladi. Odatda, uni almashtirish uchun atigi 5 daqiqa vaqt ketadi va uni ishlatish uchun qayta ishga tushirish mumkin va uni qayta sozlash yoki kalibrlash uchun vaqt sarflash kerak emas. Yana bir afzalligi shundaki, in-line filtri asbobning ba'zi qismlarining eskirishi va eskirishi natijasida hosil bo'lgan zarralarni ham filtrlashi mumkin. Men har bir suyuq fazali asbob in-line filtri bilan jihozlanganligini qat'iy qo'llab-quvvatlayman. Qo'riqlash ustuni ishlatilsa ham, men qo'riqlash ustunidan oldin in-line filtrini o'rnatishni tavsiya qilaman.
2. Himoya ustunidan foydalaning
Qo'riqchi ustun - bu xromatografik ustun oldida o'rnatilgan qisqa xromatografik ustun. U odatda 1-2 sm uzunlikda bo‘lib, o‘ram qo‘llanilgan ustunning o‘ramiga to‘g‘ri keladi va ishlatiladigan fritning g‘ovak o‘lchami ustunda qo‘llaniladigan fritdan kattaroq emas. Qo'riqchi ustuni ikkita funktsiyaga ega: (1) ustunni to'sib qo'yishi mumkin bo'lgan zarralarni to'sib qo'yishi mumkin; (2) qo'riqlash ustuni va ustun o'rami mos kelganligi sababli, ustun o'rami bilan qaytarib bo'lmaydigan darajada o'zaro ta'sir qilishi mumkin bo'lgan har qanday kimyoviy aralashmalar birinchi navbatda himoya ustuni tomonidan ushlanadi.
Qo'riqchi ustunidan foydalanish, albatta, ustunning ishlash muddatini uzaytirishi mumkin. Biroq, qo'riqlash ustunidan foydalanish yoki yo'qligini ko'rib chiqishdan oldin, quyidagi fikrlarni baholash tavsiya etiladi:
(1) Qo'riqchi ustuni arzon emas, shuning uchun qo'riqlash ustunini sotib olish xarajatlari ustunning ishlash muddatini uzaytirish bilan qoplanishi mumkinligini ko'rib chiqing;
(2) Qo'riqchi ustunining ishlash muddati qancha? Xromatografik ustunni ifloslantirmaslik uchun qo'riqchi patronni qachon almashtirish kerakligiga e'tibor berish kerak, chunki almashtirish juda kech;
(3) Qo'riqlash ustunini qanday yuvish kerak? Yuvish paytida himoya ustunida to'plangan aralashmalarni xromatografik ustunga yuvmaslik uchun himoya ustunini va xromatografik ustunni alohida yuvish kerak;
(4) 1-2 sm qo'riqlash ustunining qo'shilishi tufayli ustun samaradorligini oshirishni kutmang. Qo'riqchi ustunini o'rnatish ustun uzunligini oshirishga o'xshash bo'lsa-da, himoya ustunidan foydalanish ikkita konnektor va birlashtiruvchi quvurlarni ham qo'shadi, bu esa asboblar tizimining ustun samaradorligini pasaytiradi, shuning uchun qo'riqchisiz ustun samaradorligi yaxshi bo'ladi. ustun saqlanishi mumkin edi.
Aytishga hojat yo'q, qo'riqlash ustunlaridan foydalanish, albatta, ustunning ishlash muddatini uzaytirishi mumkin, ammo har bir laboratoriyada qo'riqlash ustunlariga bo'lgan ehtiyojni iqtisodiy va harakat nuqtai nazaridan baholash tavsiya etiladi. Qo'riqlash ustuni bo'lsa ham, men qo'riqlash ustuni va avtonamuna oluvchi o'rtasida chiziqli filtr qo'yishni maslahat beraman, chunki in-line filtrini almashtirish qo'riqlash ustunini almashtirishdan ko'ra arzonroq va himoya ustuni va ustunning ishlash muddatini oshiradi. .
3. Ishlov berilmagan namunalarni kiritmang
Oldindan ishlov berish yoki davolashsiz, barcha namunalarni in'ektsiyadan oldin filtrlash yoki santrifüj qilish tavsiya etiladi. Misol uchun, zarrachalarni olib tashlash va shu bilan xromatografik ustun fritining tiqilib qolishini kamaytirish uchun namuna filtrli membrana orqali filtrlanganda, filtr membranasining g'ovak o'lchami xromatografik ustun fritining gözenek hajmidan kichikroq bo'lishi kerak. Odatda, zarralari 3 mkm dan katta bo‘lgan xromatografik ustunlar uchun 2 mkm frit, 3 mkm zarrachalari bo‘lgan xromatografik ustunlar uchun 0,5 mkm frit, zarralari 3 mkm dan kichik bo‘lgan ustunlar uchun odatda 0,2 mkm ishlatiladi. frit, shuning uchun umumiy 0.45 mkm filtrlar asosan sub-2 mkm zarrachalardan tashqari barcha xromatografik ustunlarda ishlatilishi mumkin; pastki-2 mkm zarrachalari boʻlgan ustunlar uchun odatda 0,2 mkm teshiklari boʻlgan filtrlardan foydalaniladi. Aksariyat filtrli membranalar oldindan qadoqlangan bo‘lib, ularni filtrlash uchun to‘g‘ridan-to‘g‘ri shpritsga ulash yoki 96-quduq plastinkasida filtr plitasi sifatida ishlatish mumkin.